小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞可用于體外藥物模型和系統(tǒng)評價

　　小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞是神經(jīng)膠質(zhì)形成的主要功能細胞，膠質(zhì)細胞是在大腦從早期發(fā)育到成熟的轉(zhuǎn)變過程中產(chǎn)生的。當(dāng)程序性細胞死亡，或大腦發(fā)育過程中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或病理性損傷時，膠質(zhì)細胞可作為大腦中的巨噬細胞。當(dāng)II類組織相容性復(fù)合物表達CD-4陽性T細胞時，膠質(zhì)細胞可以表達抗原，可以進行FC介導(dǎo)的巨噬細胞，并與造血細胞和巨噬細胞共享抗原。小鼠星形膠質(zhì)細胞來源于正常小鼠腦組織，經(jīng)胰蛋白酶消化制備。優(yōu)化靶細胞的生長條件，從而減少對雜細胞（如脂肪細胞、成纖維細胞等）的污染，保證質(zhì)量的穩(wěn)定性。經(jīng)過10代仍能保持原代細胞的分化狀態(tài)，可用于體外藥物模型和系統(tǒng)評價。
 

　　1、首先觀察小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)基是否有滲漏、混濁現(xiàn)象。

　　2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。由于運輸問題，會有少量貼壁細胞從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶的瓶蓋，將細胞放入細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2-4小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

　　3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞的相關(guān)信息，如粘附特性（粘附/懸浮）、細胞形態(tài)、使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代率、換液頻率等。

　　4、靜置后，取出細胞培養(yǎng)瓶，記錄細胞狀態(tài)；建議細胞繼代培養(yǎng)后定期拍照記錄細胞生長狀況。

　　5、貼壁細胞：如果細胞生長密度超過80%，可以正常傳代；如果不超過80%，則將細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基取出，留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達到80%左右，然后進行繼代培養(yǎng)操作，瓶蓋可以稍微松開。

　　6、細胞懸浮：將小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)瓶中的液體全部轉(zhuǎn)移到50ml無菌離心管中，1200rpm離心5min。離心后，收集上清培養(yǎng)基備用。加入5ml培養(yǎng)基吹干并重懸管底的細胞沉淀。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分裝于兩個細胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，加入培養(yǎng)基至5ml；如果細胞密度不超過80%，將細胞懸液移至原瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達到80%左右。